多化性桑蚕品种的体外受精研究初报*华南农业大学蚕桑系锺生泉唐维六近年来，为了保存遗传资源，许多学者对卵巢和精子等生殖源的长期保存技术进行了试验。为了使其实用化，人工受精法和体外受精法成了重要的研究课题。关于蚕的体外受精，国外已有试验研究。印度Deofiikor(1974，1977)用蓖麻蚕精液稀释液浸泡桑蚕未受精卵，孵化出的蚕体形特大，结出椭圆形大而白的歧(试验用桑蚕品种为纺锤形黄绿色茧)。日本须贝悦治(1986)进行了蚕桑体外受精试验研究，结果指出：用交尼囊内精子处理蚕卵的受精率为9％，用受精囊内精子处理的受精率为28．2％，但受精卵能够发育到化乌期的仅有6．4％，其他大部分在初期阶段死亡，未能得到l头蚁蚕。在国内，尚未见有上述研究的报道。作者以开发桑蚕体外受精法为目的，进行了体外受精的试验研究。由于本试验是探索性的，存在的问题不少，有待今后进一步完善和研究。现将初步结果总结如下。材料和方法(一)材料为了减少蚕卵浸酸对试验带来的影响及便于观察比较，供试的蚕品种为形态性状具有明显差异的多化性不着色卵蚕品种“演金黄”(黄血、黄茧)和“655"(白血、白茧)。以“演金黄”为供体，"655"为受体o(二)方法将自交4小时的“演金黄”拆对后的雌蛾，在蒸馏水中解剖，取出含有精子的交尾囊洗净，放在载玻片上用滤纸吸干水分，捣碎，加入少许的蒸馏水，搅拌均匀，然后除去交尾囊的组织碎片，得到精于稀释液。从未交配的"655"雌蛾的卵巢中取出卵洗净吸干水分，数200粒放在精子稀释液中浸泡5小时进行体外受精。处理后的蚕卵放在培养皿中按常规催青，最后调查其孵化率。孵化出的蚁蚕，放在培养皿中按常法饲育。结果和分析试验在1986年第三造蚕期进行，5月9日进行体外受精处理。经体外受精处理的卵有4粒在5月16日点青化乌，5月17日孵化出4头蚁蚕。能受精而至孵化的占处理蚕卵的2％。孵化出的4头蚁蚕养到5龄期的第三天(6月3日)，由于桑叶中毒，4头蚕(2头雌，2头雄)全部死亡。本试验能得到桑蚕休外受精的蚕幼虫(附图)，尚属首次。<7附图体外受精的桑蚕五龄幼虫(上：雄，下：雌)本试验研究得到的点青化乌卵或蚁蚕，究竟是真正受精卵发育而形成，抑或是由于受刺激产生的孤雌生殖呢?从得到的4头蚕分析，当养到5龄时，观察皮肤可以看到蚕幼虫都是黄血(Y／+Y)，黄血基因(Y)显然是从“演金黄”供体而来的。因此，可以判断是从体外受精而得到的杂交种，不是孤雌生殖而成，如果是孤雌生殖，则蚕幼虫应该是白血(+’／+’)龊y。*本文得到吴维光副教授提供修改意见，黄振苎工程师摄制照片，厂‘东竹农科院蚕研所提供试验用蚕品种，特此一并蹿丧感谢。广东农业科学